विषयसूची:
- क्या आरएनए भंवर करना सुरक्षित है?
- क्या आप आरएनए को गर्म कर सकते हैं?
- आप आरएनए पेलेट्स को कैसे फिर से निलंबित करते हैं?
- आप आरएनए कैसे अवक्षेपित करते हैं?
वीडियो: क्या आप आरएनए को भंवर में डाल सकते हैं?
2024 लेखक: Fiona Howard | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2024-01-10 06:37
यदि आप रैंडम प्राइमिंग आरटी कर रहे हैं, तो
वोर्टेक्सिंग आपके आरएनए को अनुपयोगी बनाने के लिए शीयर नहीं करेगा। Invitrogen तकनीक का समर्थन भी सही है। क्लोरोफॉर्म ट्राईजोल से भारी है और ट्यूब के नीचे तक डूब जाएगा।
क्या आरएनए भंवर करना सुरक्षित है?
कतरनी से बचने के लिए Trizol lysates या RNA नमूनों को भंवर में न डालें। निष्कर्षण के बाद, आरएनए नमूनों को हर समय बर्फ पर रखें। यह प्रोटोकॉल 1.5 या 2mL ट्यूब में 1mL Trizol के नमूनों के लिए डिज़ाइन किया गया है।
क्या आप आरएनए को गर्म कर सकते हैं?
इसलिए, उच्च तापमान ( +65°C से ऊपर) से बचें क्योंकि ये आरएनए की अखंडता को प्रभावित करते हैं। इसके बजाय, द्वितीयक संरचनाओं को पिघलाने के लिए, आरएनए को +65°C पर 15 मिनट के लिए डिनाट्यूरिंग बफ़र्स की उपस्थिति में गर्म करें।
आप आरएनए पेलेट्स को कैसे फिर से निलंबित करते हैं?
अपने पेलेट को गर्म पानी (40-50 डिग्री सेल्सियस) के साथ फिर से सस्पेंड करें। 45 डिग्री सेल्सियस में 10 मिनट के लिए सेते हैं। उन्हें में +4 में 4-6 घंटे के लिए रखें।
आप आरएनए कैसे अवक्षेपित करते हैं?
ए.
नमक की सघनता को समायोजित करने के बाद, आरएनए को इथेनॉल की 2.5 मात्रा या आइसोप्रोपेनॉल की 1 मात्रा जोड़कर और अच्छी तरह से मिलाकर, अवक्षेपित किया जा सकता है। इसके बाद -20 डिग्री सेल्सियस पर कम से कम 15 मिनट तक ठंडा करें।
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