द्विआण्विक प्रतिदीप्ति पूरकता (BiFC) परख एक विधि है जिसका उपयोग विवो में प्रोटीन-प्रोटीन अंतःक्रिया की प्रत्यक्ष रूप से कल्पना करने के लिएलाइव-सेल इमेजिंग या निश्चित कोशिकाओं का उपयोग किया जाता है। … बीआईएफसी को सबसे पहले हू एट अल द्वारा वर्णित किया गया था।
द्विआण्विक प्रतिदीप्ति पूरकता कैसे कार्य करती है?
BiFC का कार्य सिद्धांत एक फ्लोरोसेंट कॉम्प्लेक्स के विकास पर आधारित है, एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन के दो खंडों के जुड़ाव के परिणामस्वरूप, जब वे टुकड़ों में प्रोटीन-प्रोटीन परस्पर क्रिया के कारण निकटता में होते हैं, अर्थात।, BiFC में, एक फ्लोरोफोर को अमीनो में विभाजित किया जाता है और कार्बोक्सिल टर्मिनल समाप्त होता है।
BiFC टेस्ट क्या है?
द्विआण्विक प्रतिदीप्ति पूरकता (BiFC) परख जीवित कोशिकाओं में प्रोटीन अंतःक्रियाओं के सरल और प्रत्यक्ष दृश्य को सक्षम बनाता है (45)।बीआईएफसी दृष्टिकोण एक फ्लोरोसेंट कॉम्प्लेक्स के गठन पर आधारित है, जब दो प्रोटीन एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन के गैर-फ्लोरोसेंट टुकड़ों से जुड़े होते हैं (चित्र)
BiFC टेस्ट क्यों किया जाता है?
BiFC का विचार है आपके रुचि के प्रोटीन से जुड़े GFP के हिस्सों को व्यक्त करना यदि POI परस्पर क्रिया करते हैं, तो आप कार्यात्मक GFP प्राप्त करने के लिए दोनों हिस्सों को एक साथ ला सकते हैं। तो अगर सेल में व्यक्त GFP का आधा हिस्सा है, तो मुझे आश्चर्य नहीं है कि एक GFP एंटीबॉडी इसका पता लगा सकता है।
क्या BiFC प्रतिवर्ती है?
BiFC परिसरों की अपरिवर्तनीयता को अच्छी तरह से प्रलेखित किया गया है (10), और ऐसा प्रतीत होता है कि अधिकांश, यदि सभी नहीं, तो फ्लोरोसेंट प्रोटीन- आधारित BiFC सिस्टम अपरिवर्तनीय हैं (8, 33, 43, 48-51).
